期刊简介
本刊及时向广大读者介绍国外医学微生物学，包括细菌、病毒、真菌、抗感染免疫等在临床、基础及实验检验等方面的最新动向和研究进展，供从事医学微生物学和免疫学的科研、教学、临床、检验工作者、卫生防疫以及其他从事卫生事业人员参考。
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- 杂志名称：微生物与感染杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学
- 国际刊号：1673-6184
- 国内刊号：31-1966/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：获卫生部《国外医学》系列评比三等奖期刊收录：万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
聚合酶链反应-高分辨率熔解曲线技术在下呼吸道细菌鉴定中的应用
赵焕英；薛冰；方霄；陈瑛；郭伟
关键词：聚合酶链反应-高分辨率熔解曲线技术, 微生物菌群, 16S rDNA文库, 慢性阻塞性肺病, 哮喘
摘要：为探讨聚合酶链反应‐高分辨率熔解曲线（PCR‐HRM）技术在检测呼吸道菌群中的应用，本研究用支气管镜从慢性阻塞性肺病患者下呼吸道采集分泌液，提取细菌总DNA ，以16S通用引物27F／1492R扩增16S rDNA全长，PCR产物经电泳、纯化后连接到pGEMT‐Easy载体上，构建16S rDNA克隆文库。然后以16S rDNA V3区通用引物338F／518R扩增克隆文库，V3区PCR‐HRM分析在罗氏LightCycler 480实时荧光定量PCR系统中进行，采用HRM基因扫描软件分析数据。根据不同 HRM图型，挑选克隆株测序并鉴定菌株。结果显示，PCR‐HRM技术可灵敏区分下呼吸道不同细菌16S rDNA V3区，根据 HRM图谱可极大减少克隆菌株测序样本，提示PCR‐HRM技术可作为一种快速、高通量、敏感、经济的菌群多样性检测方法。
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