期刊简介
本刊及时向广大读者介绍国外医学微生物学，包括细菌、病毒、真菌、抗感染免疫等在临床、基础及实验检验等方面的最新动向和研究进展，供从事医学微生物学和免疫学的科研、教学、临床、检验工作者、卫生防疫以及其他从事卫生事业人员参考。
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- 杂志名称：微生物与感染杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学
- 国际刊号：1673-6184
- 国内刊号：31-1966/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：获卫生部《国外医学》系列评比三等奖期刊收录：万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
表皮葡萄球菌基因删除突变株构建方法的研究
娄强；朱涛；王家学；吴旸；朱于莉；瞿涤
关键词：基因删除, pMAD, pBT2, 表皮葡萄球菌, 双组分信号转导系统
摘要：目的 探讨高效的表皮葡萄球菌基因删除突变株构建方法.方法 分别应用2种不同的穿梭质粒pMAD和pBT2,连接目的基因表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS、saeRS和lytS的上下游片段,构建重组质粒,电转入金黄色葡萄球菌RN4220后转入表皮葡萄球菌1457,利用抗性和生物标志筛选出针对特定目的基因的突变株SE1457-△arlS、SE1457-△saeRS和SE1457-△lytS,比较2种方法的优、缺点.结果 利用pMAD和pBT2分别构建基因删除同源重组质粒pMAD-△saeRS、pBT2-△arlrlS和pBT2-AlytS,并均获得相应的表皮葡萄球菌基因删除突变株.在筛选过程中,以pMAD为载体构建基因删除突变株,仅需1轮抗性/蓝白斑筛选过程即获突变株;而以pBT2为载体构建基因删除突变株筛选方法,需经过5～10轮的筛选才可获得突变株.基因删除突变株经聚合酶链反应(PCR)和测序等鉴定确认.与野生株相比,SE1457-△arlS突变株的生物膜形成能力降低90.96%,而SE1457-△saeRS和SE1457-△lytS株的生物膜形成能力略有增加.结论 以pMAD载体构建表皮葡萄球菌突变株比较快速和简便.
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