期刊简介
本刊及时向广大读者介绍国外医学微生物学，包括细菌、病毒、真菌、抗感染免疫等在临床、基础及实验检验等方面的最新动向和研究进展，供从事医学微生物学和免疫学的科研、教学、临床、检验工作者、卫生防疫以及其他从事卫生事业人员参考。
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- 杂志名称：微生物与感染杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学
- 国际刊号：1673-6184
- 国内刊号：31-1966/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：获卫生部《国外医学》系列评比三等奖期刊收录：万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏
艾滋病患者APOBEC3G基因的克隆和真核表达
王珍燕；江雪艳；张云智；卢洪洲
关键词：APOBEC3G, 真核表达, 艾滋病
摘要：目的 建立艾滋病(AIDS)患者载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)的真核表达体系.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术从AIDS患者外周血单个核细胞(PBMC)中获取APOBEC3G基因编码区,将其克隆到pMD18-T载体上,测序验证正确后再将其转接入真核表达载体pEGFP-N1中,然后将重组质粒pEGFP-N1-A3G转染HEK293T细胞,分别用RT-PCR法和蛋白印迹法(Western印迹法)验证APOBEC3G在mRNA和蛋白水平的表达.结果 从AIDS患者体内克隆的APOBEC3G基因编码区长度为1 154 bp,测序结果与GenBank中APOBEC3G参考序列(NM021822)比对发现存在2处差异,分别位于mRNA第588位和746位碱基处.重组质粒pEGFP-N1-A3G转染HEK293T细胞,在荧光显微镜下观察到融合蛋白A3G-EGFP的表达,RT-PCR法和Western blot法分别验证了蛋白在mRNA和蛋白水平的表达.结论 成功构建了AIDS患者APOBEC3G蛋白的真核表达体系,为进一步研究APOBEC3G在HIV-1感染中的作用奠定了基础.
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